千舍生物
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2020-315
酶聯(lián)免疫吸附實驗ELISA一．實驗?zāi)康拿嘎?lián)免疫吸附測定（enzyme-linkedimmunosorbentassay簡稱ELISA）是在免疫酶技術(shù)（immunoenzymatictechniques）的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù),ELISA過程包括抗原（抗體）吸附在固相載體上稱為包被，加待測抗體（抗原）,再加相應(yīng)酶標記抗體（抗原）,生成抗原（抗體）--待測抗體（抗原）--酶標記抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計的光吸收計算抗體（抗原）的...
查看更多2020-315
樣品前處理：a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。c)對于組織樣品：把組織剪切成細小的碎片。按照每20...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物提示細胞培養(yǎng)需注意哪些細節(jié)養(yǎng)細胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顧小孩一樣仔細對待，愛護她，呵護她。如果你照顧的時候能注意這些問題，會讓你的細胞養(yǎng)的更好。下面就將養(yǎng)細胞的注意事項跟大家交流一下。一、細胞培養(yǎng)前的準備在您帶上手套開始細胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細胞污染的風(fēng)險。細胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實驗時間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。結(jié)...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物教你如何挽救細胞污染以自建細胞系(laryngealsquamouscarcinoma-1，LSC-1)第12代的某一被細菌污染的細胞株采取救治，比較效果并分析細胞生物學(xué)特性。一、實驗方法1、抗生素法：細菌培養(yǎng)：用無抗生素*培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞3d，收集上清離心后將沉淀物接種于血瓊脂培養(yǎng)基，35e培養(yǎng)。所采用的抗生素包括臨床常用的15種抗生素，抗生素zui適抑菌濃度篩選:根據(jù)細菌藥敏實驗結(jié)果選出敏感抗生素，每種抗生素從zui低抑菌濃度MIC到zui高耐藥濃度分別配制6個...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物教你如何解決“細胞空泡化”“細胞空泡化”在細胞培養(yǎng)中也是一個常見問題，它的出現(xiàn)原因有多種，實驗人員碰到往往會很頭疼。在文章中小給列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因，方便大家進行分析選擇解決的方法。一、可以引起細胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些？1.細胞老化原代細胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態(tài)，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。傳代細胞出現(xiàn)這種狀況比較少見，出現(xiàn)的原因一般都是因為細胞傳代次數(shù)過多，老化嚴重。2.PH值培養(yǎng)液的PH值與細胞正常所需...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物教你如何選擇培養(yǎng)基和血清細胞培養(yǎng)是實驗室里常規(guī)和基礎(chǔ)的實驗了，但卻不是簡單的。別小看細胞培養(yǎng)，這里可蘊含著大學(xué)問。有時候細胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，GIBCO、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。◆MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物提示細胞培養(yǎng)需注意事項細胞培養(yǎng)在生命科研的地位舉足輕重。實驗君的很多成果可謂是成也細胞培養(yǎng)，敗也細胞培養(yǎng)。然而細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀！科研人是不會這么被輕易打敗的。1.新買的細胞如何處理？細胞剛拿到手應(yīng)趕緊做這幾件事：檢測瓶子是否破裂；培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁；是否有支原體污染；迅速擴增凍存。2.能否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無...
查看更多2020-312
蘇州千舍生物教你如何培養(yǎng)細胞之細胞消化細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就細胞消化而言，多做、善于總結(jié)，就可以把細胞養(yǎng)的越來越好。絕大部分細胞消化只要用胰酶潤洗一遍即可：吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞（絕大部分1min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37度消化。怎樣算是消化好了呢？不需要把細胞全部消化成間隔分布很離散的單個圓形...
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