Mahlavu 人肝癌細胞

細胞特性

1） 來源：人 肝組織

2） 形態(tài)：上皮細胞樣  貼壁生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

運輸和保存：干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完quan培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完quan培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。               

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備DMEM 培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完quan培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完quan培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完quan培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白mei-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完quan培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

下面T25瓶為例；

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

人多發(fā)性骨髓瘤細胞 MM.1R

人多發(fā)性骨髓瘤細胞 MM.1S

人急性淋巴母細胞白血病細胞 MOLT-4

人胚肺成纖維細胞 MRC-5（有限細胞系）

人急性淋巴母細胞白血病細胞 MT-4

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞 MUM2B

人前B急性淋巴細胞白血病細胞 NALM-6

人畸胎癌細胞 NCCIT

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299

人肺腺癌細胞 NCI-H1395

人肺癌細胞 NCI-H1437

人非小細胞肺腺癌細胞 NCI-H157

人肺支氣管癌細胞 NCI-H1650[H1650]（MKN-1）

人肺癌細胞 NCI-H1703

人肺癌細胞 NCI-H1944

人肺腺癌細胞 NCI-H1975

人肺癌細胞 NCI-H2126

人肺鱗癌細胞 NCI-H226

人肺癌細胞 NCI-H23

人肺癌細胞(淋巴結轉移) NCI-H292

人腎上腺皮質細腺癌細胞 NCI-H295R

人非小細胞肺癌細胞  NCI-H358

人小細胞肺癌細胞 NCI-H446

人大細胞肺癌細胞 NCI-H460 [H460]

人大細胞肺癌細胞 NCI-H661[h661]

人胃癌細胞 NCI-N87

人胃癌細胞熒光素酶標記 NCI-N87+LUC

人膽囊癌細胞 NOZ

人腎癌細胞 OS-RC-2

人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3

人結直腸癌細胞 P53R [JHU-56]  

人胰腺癌細胞 Panc 03.27

人胰腺癌上皮細胞 Panc 05.04

人胰腺癌細胞 PANC-1

人胰腺癌細胞吉西他濱耐藥株 PANC-1/GEM

人胰腺癌細胞  PANC10.05

人胰腺癌細胞 PATU8988t（PATU8988）

人胰腺癌細胞 PATU8988S

人前列腺癌 PC-3

人肺癌細胞 pc-9

人胰腺導管腺癌細胞 PL45

人肝癌細胞 PLC/PRF/5

人胚腎細胞 ProPakA.6

人正常肝細胞 QSG-7701

人淋巴瘤細胞 Raji

人B淋巴瘤細胞 RAMOS RA1

人肝膽管癌細胞 RBE

人橫紋肌肉瘤細胞 RD

人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞 REH

人子宮內膜癌細胞 RL95-2

人多發(fā)性骨髓瘤細胞 RPMI8226

人結腸腺癌細胞 RKO

人膀胱移行細胞乳頭瘤 RT4

人前列腺正常細胞 RWPE-1

人前列腺正常細胞 RWPE-2

人小細胞肺癌 SBC-2

人膀胱鱗癌細胞 SCaBER

人神經母細胞瘤細胞 sh-sy5y

人神經母細胞瘤細胞 sh-sy5y轉染突變型

人神經母細胞瘤細胞 sh-sy5y轉染野生型

人子宮頸鱗癌細胞 SIHa

人乳腺癌細胞 SK-BR-3

人乳腺癌細胞 SK-BR-3+IUC

人肝腹水腺癌細胞 SK-HEP-1

人低分化肺腺癌細胞 SK-LU-1

人皮膚黑色素瘤細胞 SK-MEL-2

人皮膚黑色素瘤細胞熒光素酶標記 SK-MEL-2+LUC

人肺鱗癌細胞 SK-MES-1

人神經上皮瘤細胞 SK-N-MC

人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1

人神經母細胞瘤細胞 SK-N-SH

人卵巢癌細胞 SK-OV-3

人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC

人肝癌細胞 smmc-7721

人腦膠質瘤 SNB-19

人肝癌細胞 snu-1

人肝癌細胞 Snu-182

人膀胱上皮永生化細胞 sv-huc-1

人滑膜肉瘤細胞 SW982 [SW-982]

人結腸腺癌細胞 SW1116

人腎上腺皮質小細胞癌細胞 SW-13

人腎上腺皮質小細胞癌細胞 SW1353

人胰腺癌細胞 SW1990

人結腸腺癌細胞 SW480

人甲狀腺癌細胞 SW579

人結直腸腺癌細胞 SW620

人結直腸腺癌細胞+GFP SW620+GFP

142140210 SW620/5FU

人膀胱移行細胞癌 SW780

人膀胱移行細胞癌細胞 T24

人乳腺導管癌細胞 T47D

人膠質母細胞瘤 T98G

人食管癌細胞 TE-1

人食管癌細胞 TE-12

人單核細胞白血病細胞 thp-1

人腦膠質瘤 TJ905

人乳頭狀甲狀腺癌細胞株 TPC-1

人甲狀腺癌細胞 TT

人喉癌細胞 TU212

人喉癌細胞 TU-138

人腦星形膠質母細胞瘤 U118MG（U-118MG）

人成骨肉瘤細胞 U-2 OS

人類星形膠質細胞瘤細胞 U251 MG (KO)

人骨髓瘤細胞 U266

人腦星形膠質母細胞瘤 U87MG

人腦星形膠質母細胞瘤+RFP U87MG+RFP

人淋巴瘤細胞 U-937

人膀胱移行細胞癌 UM-UC-3

人前列腺癌細胞 VCAP

人視網膜神經膠質瘤細胞 WERI-RB-1

人黑素瘤細胞 WM-115

人正常前列腺基質永生化細胞 WPMY-1

人正常肝細胞 WRL68

云南宣威人肺腺癌細胞系+GFP XWLC-05+GFP

人膽囊癌細胞系 ZJU-0430

人膽囊癌細胞系熒光素酶標記 ZJU-0430+LUC

人乳腺癌細胞 ZR-75-1

Mahlavu 人肝癌細胞

豬腎細胞系 LLC-PK-1 DMEM+10%FBS+1%P/S   貼壁生長

豬腎細胞系 PK-13 DMEM+10%FBS+1%P/S   貼壁生長

豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S  貼壁生長

豬髖動脈內皮細胞 PIEC 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長