WINSERA無外泌體胎牛血清

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，胎牛血清（FBS）一直是不能缺少的營養(yǎng)補(bǔ)充劑。然而，傳統(tǒng)FBS中含有大量外泌體，可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，特別是在干細(xì)胞研究、腫瘤微環(huán)境分析及外泌體相關(guān)實(shí)驗(yàn)中。蘇州千舍生物科技有限公司推出的無外泌體特級胎牛血清（Exosome-Free FBS），通過超高速離心結(jié)合納米過濾技術(shù)，有效去除外泌體，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

貨號： FBS050-EXO

規(guī)格：50ML

品牌：WINSERA

關(guān)鍵優(yōu)勢：

高純度：外泌體去除率>99%，避免外源性RNA、蛋白質(zhì)干擾

高穩(wěn)定性：批次間差異極小，適用于長期實(shí)驗(yàn)

低內(nèi)毒素：<1 EU/mL，減少細(xì)胞毒性風(fēng)險(xiǎn)

外泌體的分離方法這么多，選擇哪種更好？

答：外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題，獲得高純度的外泌體對后續(xù)的研究至關(guān)重要。據(jù)了解，目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、 超濾、 沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離：

1、 超速離心法（差速離心）超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（ 如圖所示） ，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過程比較費(fèi)時，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外，重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。

2、密度梯度離心在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心，樣品中的外泌體將在 1.13-1.19g/ml

的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時。

3、超濾離心由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì)，利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進(jìn)行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法。

4、磁珠免疫法外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如 CD63、 CD9 蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受 pH 和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以廣泛普及。

5、PEG-base 沉淀法聚乙二醇（ PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（ 假陽性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20 等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。

6、 試劑盒提取近幾年來，市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設(shè)計(jì)的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。